Bakterioskopie je diagnostickou technikou, která umožňuje rychle a jednoduše identifikovat výskyt infekcí, protože pomocí specifických barevných technik je možné bakteriální strukturu mikroskopu vizualizovat.
Tento test lze provést s jakýmkoli biologickým materiálem a lékař musí uvést materiál, který má být odebrán a analyzován, a výsledek ukazuje, zda byla ověřena přítomnost nebo nepřítomnost bakterií, jejich množství a charakteristiky.
Co je na tom
Bakterioskopie je diagnostický test, který lze provést s jakýmkoli biologickým materiálem a lze ho použít k rychlé identifikaci bakteriálních infekcí:
- Sexuálně přenosná onemocnění, jako je kapavky a chlamydie, například penilní nebo vaginální sekrece, se používají pro tento účel. Sběr se provádí pomocí sterilního tamponu a je kontraindikován k provedení hygieny genitální oblasti 2 hodiny před vyšetřením a ani k sexu během 24 hodin před odběrem;
- Tonsillitida, protože díky shromažďování sekretů hrdla je možné identifikovat gram-pozitivní bakterie odpovědné za zánět v amygdale, za přítomnosti streptokokových bakterií;
- Infekce v močovém systému, které se provádí analýzou prvního moči;
- Tuberkulóza, ve které je analyzována sputa;
- Infekce v chirurgických poraněních, jelikož je běžné, že se po operacích objevují infekce v důsledku snížení imunitního systému osoby. Tak může být sbírka sekrece rány se sterilním tamponem indikována k ověření možné přítomnosti bakterií v místě;
- Poranění kůže nebo nehtů, která se skládá ze sběru povrchového vzorku, nepoužívat krémy a smalty nejméně 5 dní před vyšetřením. Ačkoli lze provádět bakterioskopii, houby jsou obvykle pozorovány například při zkoumání vzorku nehtů.
Navíc může být bakterioskopie použita k diagnostice bakteriální meningitidy, respiračních a gastrointestinálních traktů a může být provedena biopsií nebo análním materiálem.
Bakterioskopie je laboratorní technikou, která může být použita v klinické praxi k diagnostice onemocnění způsobených bakteriemi, což indikuje vlastnosti příčinného původu onemocnění a umožňuje lékaři zahájit léčbu ještě předtím, než je identifikován v laboratoři, což může trvat asi 1 týden.
Jak se to dělá?
Bakteriální vyšetření se provádí v laboratoři a materiál shromážděný od pacienta se analyzuje v mikroskopu, aby se kromě vlastností vyšetřila nepřítomnost nebo přítomnost bakterií.
Příprava ke zkoušce závisí na materiálu, který bude shromážděn a analyzován. V případě vaginálního materiálu se nedoporučuje, aby žena hygienizovala 2 hodiny před vyšetřením a neměla v posledních 24 hodinách styk, zatímco v případě sběru nehtů nebo kožního materiálu se doporučuje neprojít smaltu, krémů nebo látek na kůži před vyšetřením.
V případě vzorku vaginální sekrece se například tampon, který byl použit k vytvoření sběru, prošel kruhovými pohyby na sklíčku, který musí být identifikován s pacientovými iniciálymi a pak obarvený barvením Gram. V případě vzorku sputu, například materiálu, který se shromažďuje hlavně k ověření přítomnosti bakterie odpovědné za tuberkulózu, je barvení použité v bakterioskopii Ziehl-neelsen, který je specifičtější pro tento typ mikroorganismu.
Normálně, když je ověřena přítomnost bakterií, provádí laboratoř identifikaci mikroorganismu a antibiogramu, což poskytuje úplnější výsledky.
Jak se dělá Gramová skvrna?
Zbarvení gramů je jednoduchá a rychlá barvicí technika, která umožňuje diferenciaci bakterií podle jejich vlastností, umožňující diferenciaci bakterií na pozitivní nebo negativní podle jejich zabarvení, umožňující jejich vizualizaci pod mikroskopem.
Tato metoda barvení používá dvě hlavní barviva, jednu modrou a jednu růžovou barvu, která mohou bakterie skvrnit nebo ne. Bakterie zbarvené modře jsou považovány za gram-pozitivní, zatímco ty v růžové se nazývají gram-negativní. Z této klasifikace je možné, že doktor zahájí preventivní léčbu ještě před identifikací mikroorganismu.
Porozumět tomu, jak je Gramová skvrna
Bakteriální identifikace gramovým barvením je rychlá, praktická a levná a je nezbytná pro lékaře, protože jsou známé specifické vlastnosti těchto skupin bakterií a doktor může indikovat preventivní léčbu založenou pouze na barvení gramu.
Toto zabarvení má jako princip rozlišování bakterií podle vlastností buněčné stěny. Gram-pozitivní bakterie mají více než jednu tlustou stěnu peptidoglykanu, jsou schopny zadržet první barvivo dobře, zatímco gramnegativní bakterie mají tenčí stěnu a mohou být snadno odbarveny při vystavení alkoholu.
Gramové barvení se provádí v 5 hlavních krocích, ale protokol se může lišit podle laboratoře:
- Zakryjte čepel fialovým krystalovým barvivem a nechte působit asi 1 minutu;
- Umyjte čepel proudem tekoucí vody a zakryjte čepel lugolem, který má za úkol fixovat modré barvivo a nechat působit po dobu 1 minuty. Oba typy bakterií mohou absorbovat komplex tvořený barvivem a lugolem, který se mění modře;
- Poté umyjte čepel tekoucí vodou a aplikujte 95% alkoholu a nechte jej působit 30 sekund. Alkohol je zodpovědný za rozpouštění lipidové membrány, která tvoří gramnegativní bakterie, a tím odstranění vzniklého komplexu mezi barvivem a lugolem, čímž dochází k odbarvení těchto bakterií. V případě gram-pozitivních bakterií je však alkohol vyčerpán z buněčné stěny gram-pozitivních bakterií, což způsobuje kontrakci pórů a znemožňuje jejich ucpání;
- Potom opláchněte pod tekoucí vodou a pokládejte čepel druhým barvivem, fuchsinem nebo safraninem a nechte působit po dobu 30 sekund;
- Čepel by měl být opláchnut vodovodní vodou a ponechán suchý při pokojové teplotě.
Jakmile je čepel suchý, je možné umístit kapku ponorného oleje a pozorovat ostří v mikroskopu s objektivem 100x. Je možné ověřit přítomnost nebo přítomnost bakterií, stejně jako přítomnost kvasinek a epiteliálních buněk.
Co znamená výsledek?
Cílem bakterioskopického výsledku je zjistit, zda je kromě analyzovaného materiálu přítomen nebo nepřítomen mikroorganismy, vlastnosti a množství.
Výsledek je negativní, když nejsou pozorovány žádné mikroorganismy a pozitivní, když jsou mikroorganismy vizualizovány. Výsledek je obvykle uveden v kříži (+), kde 1 + znamená, že 1 až 10 bakterií bylo vizualizováno ve 100 polích a mohlo by to být příkladem počáteční infekce, a 6 + představuje přítomnost více než 1000 bakterií na pozorované pole, které například představuje chronickou infekci nebo bakteriální rezistenci, což naznačuje, že léčba není účinná.
Kromě toho jsou známé informace o barvení, které byly použity ve zprávě, například Gram nebo Ziehl-neelsen, kromě vlastností mikroorganismu jako formy a uspořádání, ať už ve skupinách nebo v řetězcích.
Normálně, pokud je výsledek pozitivní, laboratoř identifikuje mikroorganismus a antibiogram, což ukazuje, které antibiotikum se nejvíce doporučuje k léčbě infekce určitou bakterií.
