Molekulární diagnóza odpovídá množině molekulárních technik, které se zaměřují na identifikaci změn v DNA, které mohou být například příznakem genetických onemocnění nebo rakoviny. Navíc molekulární techniky jsou široce používány pro identifikaci a potvrzení infekčních onemocnění, protože představují rychlejší a přesnější diagnostickou metodu.
Molekulární diagnóza je drahá, a proto ji velmi často nepožadují lékaři, nicméně poskytuje přesné výsledky týkající se přítomnosti změny, způsobu, jakým může zasahovat do fungování organismu a reakce pacienta na onemocnění. léčbě.
Co je na tom
Molekulární diagnóza může být provedena s několika cíli, z nichž hlavní jsou:
- Identifikace mutací souvisejících s leukémií, jako je identifikace translokace BCR-ABL, která je charakteristická pro chronickou myeloidní leukémii (CML);
- Mutace charakteristické pro hematologické onemocnění, jako například dědičná hemochromatóza, polycythemie vera, esenciální trombocytémie a trombofilie, například - pochopte, co je trombofilika a jak se léčba provádí;
- Molekulární změny, které indikují výskyt rakoviny, jako je například kolorektální, plicní, rakovina prsu a mozku;
- Diagnostika infekčních onemocnění, jako je hepatitida, uretritida, toxoplazmóza, leishmanióza atd., Kromě identifikace viru HPV .
Molekulární diagnóza, přestože je v porovnání s jinými diagnostickými technikami považována za dražší, je přesnější, protože je schopna informovat o změně vztahující se k určité chorobě ao stupni vlivu této změny v organismu, a tak napomáhá léčení osoby.
Kromě toho, že jsou používány k diagnostice různých onemocnění, molekulární techniky se používají také k vyhodnocení odpovědi na léčbu, zejména u lidí s rakovinou, což je jedna z nejúčinnějších metod prokazující vývoj choroby a recidivu.
Jak se to dělá
Molekulární diagnózu lze provést libovolným vzorkem a lékař je požádán, aby poskytl informace o stavu pacienta, kterým může být moč, sliny nebo většinu času krve. Není potřeba urychlit ani žádnou jinou přípravu na vyšetření.
Vzorek je shromážděn a zaslán do laboratoře spolu s lékařským doporučením, které informuje o zkoušce nebo typu výzkumu, který by měl být proveden. Vykonaná molekulární technika závisí na požadovaném vyšetření a zahrnuje řadu přesných postupů, jejichž konečným cílem je zjistit přítomnost nebo nepřítomnost změn vyžadovaných lékařem.
Obvykle se používá pouze malé množství vzorku, zbytek se ukládá tak, že v případě potřeby se test opakuje.
Podívejte se, jaké jsou hlavní molekulární techniky
PCR
PCR, zkratka pro polymerázovou řetězovou reakci, je molekulární technikou, která se skládá z amplifikace fragmentu genetického materiálu, ať DNA nebo RNA, s cílem identifikovat mutace a tím napomáhat diagnostice onemocnění.
Tato technika je tvořena extrakcí a čištěním genetického materiálu, který je potom umístěn do směsi, ve které jedna ze složek je restrikčním enzymem, který se mění podle požadovaného vyšetření a jehož funkcí je rozřezat materiál na fragmenty identifikovat možnou genetickou změnu. Směs je umístěna v termocykleru, který je zařízením, které působí změnami teploty označenými odborníkem podle zkoušky a tímto způsobem umožňuje zesílení genetického fragmentu. V případě konvenční PCR se po amplifikaci PCR produkt podrobí elektroforéze, což je molekulární technika založená na hmotnosti a velikosti fragmentů, tj. Podle těchto charakteristik se generuje vzorec pásů, jejichž analýza se provádí založené na pásmu pozitivní kontroly, tj. v pásmu, o kterém je známo, že odpovídá genetické změně.
PCR v reálném čase, nazývaný také qPCR, je druh kvantitativní PCR, tj. Kromě identifikace genetické změny, je schopen poskytnout informace o genové expresi, tj. Kolik je změněný gen exprimován v organismu, a lze tak použít k diagnostice a sledování léčby. PCR v reálném čase nevyžaduje elektroforézu, celý proces amplifikace a analýzy genetického materiálu je prováděn aparátem a výsledek je interpretován vyškoleným zdravotníkem.
Sekvenování
Sekvenování je molekulární technika, která spočívá v určení nukleotidové sekvence DNA. Sekvenování probíhá z reakce typu PCR, avšak v amplifikační směsi se přidávají nukleotidy modifikované přidáním fluorochromů, které jsou jako amplifikované látky modifikované nukleotidy začleněny do DNA a generují několik fragmentů, které odpovídá výsledku sekvenčního zpracování.
Reakční produkt se umístí do zařízení nazývaného DNA sekvencer, kde jako fragmenty narazí laser zařízení, fluorochromy jsou excitovány, emitující fluorescenci, což je indikováno zařízením pomocí píků, každý odpovídající vrchol k nukleotidu. Na konci reakce zařízení bude informovat sekvenci DNA, čímž pomůže lékaři při diagnostice genetických onemocnění.
